Биоптат что это в медицине
Гистологическое исследование биоптата органов и тканей
Описание
Гистологическое исследование биоптата органов и тканей — это исследование тканей под микроскопом.
Биопсия ткани
Биоптат — это материал, полученный путём биопсии.
В большинстве случаев биопсия — это прямой метод исследования, позволяющий точно поставить диагноз той или иной болезни. Особенно важную информацию метод биопсии имеет для распознавания опухолей. При этом следует знать, что значение имеет положительный результат исследования, т.е. результат подтверждающий предположение о заболевании. Отрицательный результат безусловно учитывается, но при этом надо помнить, что не всегда кусочек ткани берётся из того места, которое поражено болезнью.
Интерпретация результатов
С учётом полученных данных в результате проведения гистологического анализа препаратов из биоптатов исследованного органа или тканей выдаётся бланк, содержащий описание процедуры, перечень выявленных патологических изменений, диагноз.
Диагноз может носить заключительный, ориентировочный, описательный характер.
Если данных для постановки диагноза недостаточно, приводится лишь описание данных микроскопического анализа. Данная ситуация может быть обусловлена недостаточным объёмом материала, техническими погрешностями анализа, недостаточным качеством препаратов. Может быть рекомендовано повторное прохождение исследования, либо повторный микроскопический анализ имеющихся препаратов при достаточном уровне их качества.
Важность данного метода заключается в возможности получения достоверной информации о наличии злокачественного новообразования.
Как проводится гистологическое исследование: виды, методы, особенности
Злокачественные новообразования — это группа заболеваний, насчитывающая несколько тысяч видов опухолей разных типов и разной степени злокачественности. Они подразделяются на большие группы в зависимости от того из каких тканей они развиваются: если из эпителиальных (барьерных) — то это раки, если из соединительных тканей (мягких тканей и костей) – саркомы, если из лимфоидных (иммунных) – лимфомы/лейкозы. От того насколько правильно верифицирована опухоль (определен ее тип, степень злокачественности и другие характеристики) зависит правильность и эффективность лечения. Важную роль в этом играют гистологические исследования.
О том, как проходят гистологические исследования, какие задачи кроме диагностических они позволяют решать, что влияет на сроки их выполнения рассказывает заведующая патологоанатомическим отделением с прозектурой НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова, к.м.н. Анна Сергеевна Артемьева.
Что служит материалом для патоморфологических (гистологических) исследований?
Процесс получения фрагмента ткани (биоптата) — биопсия – это несколько разных способов забора материала для гистологического исследования.
Биопсию внутренних органов делают под УЗИ-навигацией, либо с помощью хирургического вмешательства.
Как обрабатывают эти материалы для проведения гистологического исследования?
1 Этап. Фиксация — «консервирование» биоптата в формалине — специальном химическом растворе, который предотвращает гниение, позволяет сохранить структуры ткани.
Фиксация биоптата может занимать от 6 до 24 часов – в зависимости от его вида и размера.
Операционный материал фиксируется дольше, в несколько этапов. Сначала предварительная фиксация, которая занимает примерно 12 часов. Затем вырезка нужных фрагментов и повторная фиксация еще 24 часа.
Соотношение объема материала к объему формалина должно быть 1:20.
2 Этап. Процессинг — процесс обезвоживания, обезжиривания и пропитки материала парафином. Автомат перемещает кусочек материала из раствора в раствор.
В качестве растворов применяются: абсолютированный изопропиловый спирт (6-8 смен), ксилол (2 смены), расплавленный парафин (2 смены).
Программа разнится для «жирного» материала (к которым относятся, например, ткани молочной железы) и «нежирного» – 36 и 24 часа соответственно.
Процесс получения парафиновых блоков.
3 Этап. Изготовление парафинового блока. Кусок материала помещается в форму с расплавленным парафином (уже другим нежели во время процессинга – с более высокой температурой плавления) и охлаждается. Выполняется вручную, сложно ускорить.
4 Этап. Изготовление срезов. Толщина образца — кусочка ткани, залитого в парафин – 1-3 мм. Толщина каждого среза 4-5 мкм (0,004-0,005 мм). Выполняет лаборант с использованием специального инструмента – микротома.
Срезы монтируются на стекла и должны высохнуть.
Несмотря на то, что часть материала теряется при выравнивании в микротоме, при должном профессионализме, из одного образца — материала от одной биопсии, операционного материала от одной опухоли, возможно изготовить около 100 стекол (микропрепаратов).
Для чего делаются срезы?
Срезы делаются для рутинной окраски гематоксилинном и эозином, иммуногистохимического исследования и других видов исследований.
Срезы для всех исследований используются одинаковые, различается окраска, могут отличаться стекла, на которые они монтируются, так для ИГХ и FISH нужны специальные адгезивные стекла или заряженные стекла.
Блоки и стекла способны храниться долгие годы и использоваться для проведения дополнительных гистологических исследований, пересмотров, а также в научных целях.
Архив гистологических материалов собирается в НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова с 1927 года и содержит более 10 млн единиц хранения (микропрепараты — стекла, парафиновые блоки, архивные карточки, влажный архив).
Какие виды гистологических исследований наиболее информативны?
Что позволяют определить разные виды гистологических исследований
Гистологическое исследование – что это такое?
Позволяет верифицировать опухоль – то есть определить из каких клеток она состоит (из какой ткани она развивается), степень ее дифференцировки (зрелости).
Рутинная окраска, выполняющаяся при гистологическом исследовании, позволяет выявить патологический процесс в анализируемом материале (биоптате, операционном материале):
Также, в большинстве случаев, благодаря рутинной окраске, можно определить степень злокачественности опухоли и, если она достаточно зрелая, то какова ее природа.
Окрашенные срезы под микроскопом
 |
Инвазивный протоковый рак er 100%.
Карцинома сигмовидной кишки.
Крупноклеточная нейроэндокринная опухоль.
МТС крупноклеточной нейроэндокринной опухоли.
Неспецифический рак молочной железы. Участок in situ карциномы внутри протока, криброзного типа.
Низкодифферинцированный рак пищевода.
При гистологическом исследовании биоптата и операционного материала можно оценить распространенность: размер опухоли и прорастание в окружающие ткани, насколько затронуты лимфоузлы и есть ли метастазы в отдаленные органы (если эти все структуры присланы для гистологического исследования). При консультации готовых микропрепаратов – стекол, это, как правило, невозможно, если опухоль больше размеров гистологической кассеты или рассечена предыдущим исследователем и не предоставлены данные макроскопического исследования.
Во время гистологического исследования изучаются все стекла от одного образца – материала, полученного от одного вмешательства — одной операции или одной биопсии, вне зависимости от их количества, это считается одной консультацией.
Сроки выполнения гистологического исследования зависят от количества микропрепаратов и от категории сложности того процесса, который в них обнаруживается, сроки могут удлиняться, особенно при необходимости использования дополнительных методов исследования и анализа дополнительных сведений. На сроки выполнения гистологического исследования влияет полнота предоставленной пациентом клинической информации, в том числе данных уже проведенных исследований.
Иммуногистохимия (ИГХ)
Сложное многоэтапное исследование, выполняется после гистологического исследования на том же материале. Опухолевые срезы окрашиваются антителами, которые способны связываться антигенами (белками), которые несут опухолевые клетки. Разные опухолевые клетки несут разные антигены, к каждому из которых подобно ключа к замку подходит антитело.
Один из этапов ИГХ
ИГХ исследование — это комбинаторика. 100% специфичных и чувствительных к какой-то опухоли маркеров не существует, но есть набор антигенов, которые в определенном типе опухоль должны быть и набор тех, которых там быть не должно, таким образом ИГХ-панель строится так чтобы включать несколько антител, которые должны быть позитивны и несколько, которые должны быть негативны. Для разных опухолей различаются эти наборы позитивных/негативных маркеров.
При проведении прогностической ИГХ – выявлении маркеров чувствительности к терапии определяется набор таких маркеров для конкретных опухолей, например, рака молочной железы: рецепторы стероидных гормонов (эстроген, прогестерон), рецептор эпидермального фактора роста (HER2) и индекс пролиферативной активности Ki67 (скорости деления клеток).
Стекла окрашиваются последовательно — различными антителами красятся наборы маркеров в несколько этапов, процесс окраски стекол одним антителом занимает 48 часов.
Таким образом, каждое антитело наносится на отдельный срез ткани, монтированный на отдельное стекло, как правило с соответствующим внешним контролем, количество реакций (используемых антител) и этапов окраски может существенно варьировать в зависимости от конкретной диагностической ситуации, все зависит от индивидуальных особенностей опухоли. Проводится такое количество окрасок, которое необходимо для того, чтобы выявить наиболее характерный для определенной опухоли набор позитивных и негативных маркеров.
Кому-то для этого будет достаточно 5 антител, а кому-то необходимо сделать 20 окрасок и более. Максимальное количество окрасок, которое нам приходилось делать – 212.
Поэтому точные сроки и стоимость этого исследования невозможно определить заранее. Разные по течению и прогнозу опухоли могут быть очень похожи друг на друга, только минимальные различия в окрашивании, с учетом клинических данных и данных других методов обследования, могут позволить установить верный диагноз.
Есть целый ряд доброкачественных опухолей, симулирующих злокачественные, в том числе высокоагрессивные, а некоторые злокачественные высоко дифференцированные опухоли трудно отличить от воспалительных и реактивных процессов. В таких ситуациях только опыт и квалификация патоморфолога, анализ всего комплекса доступной информации (снимки КТ, МРТ, рентген, протокол операции, и др.) позволяют поставить диагноз.
В грамотной интерпретации результатов ИГХ очень важна роль эксперта, ведь те случаи, с которыми приходится работать, в большинстве своем, сложные. Практически не существует антител, которые могут выступать в качестве 100%-х маркеров той или иной опухоли, врачу всегда приходится взвешивать различные вероятности.
Что определяется с помощью ИГХ?
Иммуногистохимия позволяет оценить потенциальный темп роста опухоли, ответ на химио-, таргетную, гормональную терапию.
Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH-тест)
Это метод молекулярно-генетической диагностики в ткани.
FISH проводится в срезе ткани и позволяет привязать генетическую перестройку к конкретной опухолевой клетке.
В этом тесте также используются специальные красители, которые связываются только с определенными участками хромосом. Их называют зондами, которые могут быть помечены флуоресцентным или хромогенным красителем, визуализирующимися при помощи флуоресцентного или светового микроскопа.
Технические операции по подготовке гистологических стекол к этому исследованию занимает 2 рабочих дня.
Анализ препарата с помощью многоголового микроскопа.
Полученные микропрепараты очень чувствительны к внешней среде – они могут выцвести со временем, чтобы избежать потерь информации все FISH-препараты сканируются, создается их цифровая копия, которая доступна для внешнего пересмотра. Специалисты просматривают флуоресцирующий материал в темном поле, в анализе препарата принимают участие как минимум 2 специалиста. При необходимости используется и цифровой анализ.
Что определяется с помощью FISH-теста?
FISH-тест позволят диагностировать некоторые виды опухолей, определяет целесообразность использования некоторых химиотерапевтических препаратов.
Проведение гистологического исследования, и в первую очередь FISH-теста — это экспертная работа, которая зависит от квалификации специалиста. Очень многие мутации, которые выявляются в опухолях, не всегда являются метками опухолей, они могут находиться и в доброкачественных образованиях или нормальных тканях.
За год патологоанатомическое отделение НМИЦ онкологии имени Н.Н. Петрова выполняет около 20000 гистологических исследований (пациентов), из них около 5000 консультативных случаев (пересмотров), более 30000 ИГХ исследований, а также участвует в программе внешнего контроля качества ИГХ исследований NordIQ.
Специалисты отделения обладают огромным опытом проведения гистологических исследований и экспертными компетенциями.
Скорость выполнения гистологических исследований и адекватность гистологического заключения зависят от ряда факторов:
После выполнения гистологического исследования пациент получает гистологическое заключение/протокол исследования гистологического материала.
Расшифровка гистологического исследования: на что обратить внимание?
Гистологическое заключение включает в себя несколько рубрик (полей):
Макроскопическое описание
Заполняется как для биоптатов — не обязательно, так и для операционного материала, для которого имеет крайне важное значение в ряде случаев.
Микроскопическое описание
Описание изменений на микроскопическом уровне, не обязательно к заполнению, так как вся необходимая информация может быть отражена в поле «заключение».
Результаты иммуногистохимического исследования
В этом поле описано какие антитела использовались в данном случае и каков результат окрашивания: наличие окрашивание или его отсутствие, локализация в клетке при необходимости, а также процент позитивных клеток и интенсивность реакции, когда это имеет значение.
Патологоанатомическое заключение
Содержит нозологическую/классификационную единицу, если ее возможно установить по исследованному материалу, то есть дает ответы на вопросы:
Также приводятся все необходимые прогностические данные: степень дифференцировки, параметры, влияющие на стадию, состояние краев резекции, если возможно их оценить и т.п.
Дополнительные замечания и рекомендации
Поле может содержать комментарии, относительно возможного направления дальнейшего обследования, вероятности того или иного диагноза, необходимости ознакомиться с теми или иными клиническими данными и др.
Мы не рекомендуем пациентам самостоятельно заниматься расшифровкой показателей гистологического исследования, используя информацию, полученную на различных Интернет-сайтах и форумах пациентов, так как на интерпретацию данных влияет большое количество факторов, в том числе, возраст пациента, данные других исследований и др.
Расшифровкой исследования может заниматься только специалист – врач онколог по профилю заболевания!
Авторская публикация:
АРТЕМЬЕВА АННА СЕРГЕЕВНА
заведующий патологоанатомического отделения с прозектурой ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, кандидат медицинских наук
Морфологическая диагностика
Биопсия
Это может быть толстая игла, эндоскоп (когда исследуют пищевод или желудок), световод (при бронхоскопии), обычный скальпель (во время хирургической операции).
Основное назначение биопсии
Гистологический анализ
Полученные с помощью биопсии кусочки тканей отправляют в специальную лабораторию, где проводится их гистологический анализ. Он основан на том, что все клетки организма имеют характерное строение, в зависимости от того, к какой ткани они принадлежат. При злокачественном перерождении картина кардинально меняется: внутреннее строение клетки нарушается, она перестает быть похожей на соседние. Эти нарушения, как правило, столь значительны, что их можно увидеть в обыкновенный микроскоп.
Обработка биопсии
Раньше препараты перекладывали из ванночки в ванночку вручную, теперь все стадии окраски способны проводить специальные приборы. Но это, пожалуй, единственный этап, где возможна автоматизация. Все остальные целиком зависят от умения и внимания специалистов.
Интерпретация результата
Более того, в зависимости от вида раковых «поломок» клеток, нередко удается определить также тип, особенности и даже прогноз заболевания.
Гистологическое исследование
Цитологическое исследование
Что такое «мазки на цитологию»
Цитологический метод, как и гистологический, является методом морфологической верификации диагноза. Получить материал для исследования можно из любой точки организма путем мазка или скарификата (соскоба) с поверхности образования (кожи или слизистой), пункции подкожного или внутрикожного образования, при эндоскопическом исследовании (бронхоскопии, гастроскопии, колоноскопии), из естественных или патологических жидкостей организма (например, моча, мокрота, отделяемое из соска молочной железы, выпотные жидкости из кист и полостей организма). Полученный материал равномерно распределяют на предметном стекле или помещают в закрывающийся контейнер, пробирку и направляют в цитологическую лабораторию.
Преимущества цитологического метода
Когда используется цитологический метод
Цитологический метод применяется:
Этапы цитологического исследования
Забор материала осуществляет врач на приеме: гинеколог или акушерка, онколог, узкий специалист или хирург общего профиля. Затем полученный материал направляют в цитологическую лабораторию, где фельдшера-лаборанты изготавливают цитологические микропрепараты, а врачи-цитологи изучают их под микроскопом.
В большинстве случаев на регистрацию и изготовление микропрепаратов уходит не более 30 минут. Время на микроскопическое изучение и постановку диагноза зависит от сложности микроскопической картины и информативности полученного материала. Заключение в большинстве исследований выдается в день поступления, в сложных для диагностики случаях, когда требуются дополнительные методы анализа (имуноцитохимическое, проточная цитометрия) результат можно ожидать до 10-14 дней.
Что дает цитологическое заключение
Цитологический метод является методом морфологического подтверждения диагноза, желательного в ряде неонкологических болезней и обязательного для онкологических пациентов.
При цитологическом исследовании подтверждают наличие воспаления, определяют его активность и степень выраженности, во многих случаях указывают на инфекционный агент, вызвавший воспаление, что способствует назначению правильного лечения.
Точно установить природу неопухолевого заболевания согласно международным классификациям с помощью цитологического исследования не всегда возможно, однако более важно, что в цитологии хорошо видно, если начинается злокачественное перерождение клеток, что позволит вовремя направить пациента к врачу-онкологу.
В цитологических препаратах всегда хорошо видно злокачественную природу образования. Уровень современных знаний врачей-цитологов позволяет устанавливать диагноз в соответствии с международными гистологическими классификациями злокачественных опухолей в случае наиболее распространенных заболеваний (рак легких, желудка, кишечника, матки, молочной железы), также как и более редко встречающихся (меланома, лимфомы, рак печени, почек, поджелудочной железы и др.). По результатам цитологического исследования определяют перечень необходимого обследования, планируют виды и объемы лечения, дают предварительный прогноз по исходу заболевания.
Виды биопсии
Биопсией называется способ диагностирования болезней, при котором осуществляется изъятие образцов тканей пациента и их изучение в лабораторных условиях. Подобное исследование показано в тех случаях, когда неинвазивные методы не дают достоверного результата, не могут подтвердить или опровергнуть диагноз. В первую очередь речь идет о раковых процессах, для которых биопсия является единственно надежным методом подтверждения диагноза. Однако это исследование проводится и в других случаях, например, при хронических гепатитах, воспалительных процессах в кишечнике, аутоиммунных болезнях щитовидной железы.
Разновидности процедуры
Выделяют несколько видов исследования в зависимости от способа забора материала для анализа.
Кроме того, исследования также делят на виды в зависимости от того, какая аппаратура используется в ходе изъятия образца тканей. Это
С учетом количества изъятого материала врачи могут провести такие виды исследования тканей:
Для пациента наиболее предпочтительным и наиболее легким в плане последующего восстановления является пункционная биопсия. Это несложная процедура, в ходе которой доктор вводит иглу через прокол в коже и постепенно подводит ее к внутреннему органу или новообразованию. Благодаря наличию полости в игле в ней остаются образцы тканей, которые потом и отправляются на анализ в лабораторию.
Для исследования внутренних органов, доступ к которым затруднен, ввод иглы осуществляется под контролем УЗ-датчика, рентгена.
Обычно для пункции не требуется анестезия вообще или же используется местный препарат. Для пациента это исследование является малоболезненным, хотя и не слишком приятным.
Несмотря на все преимущества этого вида забора материала, у него есть и очевидные недостатки. Во-первых, это вероятность (пусть и небольшая, но все же) не попасть иглой в тот участок органа или новообразования, который нужно взять на анализ. Во-вторых, это небольшое количество ткани, которое собирается в полости иглы.
И если первый недостаток можно компенсировать, используя специальную аппаратуру для контроля введения иглы, то второй — только путем модификации процедуры, в частности, с помощью использования толстой иглы. Такая манипуляция носит название трепан-биопсии.
Что такое трепан-биопсия: особенности метода
Для подобного исследования применяются особые иглы, снаружи у них находится резьба. Когда такая игла вводится в ткани новообразования или внутреннего органа, она вкручивается в них, подобно винтику, после чего доктор резко извлекает инструмент. На резьбе остаются образцы тканей, которых достаточно для проведения исследования.
В нашей клинике имеется самое современное оборудование для проведения биопсии, в том числе и специальные пистолеты с наборами игл. Благодаря хорошему оснащению мы можем обеспечить не только эффективность проводимых манипуляций, но и комфорт для пациентов, что не менее важно.
Биопсия простаты: как проводится, показания, последствия
Оглавление
Биопсия предстательной железы дает возможность своевременно выявить опухолевые процессы в железе, провести гистологическую диагностику и определить максимально результативную схему лечения пациента.
Более 80% пациентов с диагностированным на ранней стадии раком простаты успешно излечиваются, и немалая заслуга в этом принадлежит ранней и достоверной диагностике, выполненной с помощью биопсии. Во время данной процедуры, используя специальные инструменты, врач берет образцы тканей железы для последующего гистологического исследования.
Это малотравматичная процедура, которая проходит достаточно быстро и безболезненно для пациента и имеет высокую точность и информативность.
Способы выполнения биопсии
Для проведения биопсии используются различные методики, основное различие которых – в способе взятия образцов тканей и используемых инструментах и оборудовании. Наиболее распространенными являются следующие способы:
Показания к процедуре
Первичными показаниями к процедуре являются следующие:
Биопсия относится к инвазивным методам исследования, но ее значение в выявлении болезней предстательной железы трудно переоценить – современная медицина не имеет альтернативы этой манипуляции на данный момент.
Биопсия может быть проведена повторно при наличии следующих показаний:
Необходима ли биопсия простаты, как проводится процедура и другие нюансы вы можете уточнить у доктора-уролога в МЕДСИ.
Противопоказания
Биопсия предстательной железы не проводится в ряде случаев, к которым относятся:
При наличии у пациента ОРВИ и других заболеваний, препятствующих проведению биопсии, врач может предложить подождать нормализации состояния здоровья, чтобы исключить влияние посторонних факторов на результат исследования. Для проведения биопсии обязательным является разрешение пациента на процедуру, если оно отсутствует, биопсия не проводится.
Как правильно подготовиться к процедуре биопсии
Правильная подготовка к процедуре биопсии важна для получения как можно более точного результата. За неделю до исследования важно сделать следующее:
Если отменить принимаемые препараты нет возможности, биопсию проводят только в условиях стационара. Для исключения воспалительных процессов перед взятием образцов тканей назначаются лабораторные исследования. Если пациенту предстоит обезболивание, предварительно осуществляется проба на анестетик.
Вечером накануне исследования, а также утром в день проведения процедуры следует провести очистительные клизмы для освобождения прямой кишки, поскольку биопсию выполняют при пустом кишечнике. Исследование проводят утром, в случае общего наркоза – строго натощак.
Где выполняется процедура биопсии
Биопсия простаты – малотравматичная процедура, которая может проводится как амбулаторно, так и в условиях стационара. Для обезболивания чаще всего применяются средства местной анестезии, и в этом случае процедуру проводят амбулаторно. Если же требуется общий наркоз, спинальная или эпидуральная анестезия, а также если состояние пациента требует более серьезного медицинского контроля, исследование выполняют после госпитализации в стационар, где пациент проводит от нескольких часов до двух суток после процедуры.
Клиники МЕДСИ предлагают комфортные условия проведения биопсии, надлежащий врачебный контроль и полное соблюдение протокола процедуры, что обеспечивает высокую точность и результативность исследования.
Возможные последствия процедуры
При соблюдении пациентом правил подготовки и правильном выполнении манипуляций специалистом вероятность развития осложнений минимальна. Основной риск во время манипуляции и после нее заключается в следующих факторах:
Чего ожидать после процедуры
Процедура биопсии переносится большинством пациентов хорошо, и, если не был применен общий наркоз, или спинальная или эпидуральная анестезия, отправиться домой можно сразу после исследования. В случае использования наркоза пациенту могут предложить задержаться в лечебном учреждении на некоторое время для наблюдения за его состоянием.
Для предотвращения появления осложнений – кровотечений, возникновения гематомы – врач может порекомендовать следующие меры:
Преимущества проведения процедуры биопсии предстательной железы в МЕДСИ
В клиниках МЕДСИ соблюдаются высокие стандарты при проведении биопсии предстательной железы. Данную процедуру проводит опытный врач-уролог, используя аппарат УЗИ, который дает возможность максимально точно выявить подозрительные участки тканей. Сеть МЕДСИ предлагает клиентам, нуждающимся в биопсии предстательной железы:
Позвоните нам, если вас интересует, что такое биопсия предстательной железы, как делают процедуру, какие существуют показания к ней и другие вопросы.